液相色譜柱在使用時有什么地方需要注意的?
發(fā)布日期:2021-06-14 瀏覽次數(shù):948
液相色譜柱的系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運(yùn)動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。 1、柱效和保護(hù)柱
拿到一根新柱時,一定要先看其使說明,然后測柱效,定期檢測柱效,保留在新色譜柱上得到的色譜圖,并記錄條件,定期檢測儀器的譜帶展寬。若應(yīng)用于在線監(jiān)測,應(yīng)對色譜柱提供在線的物理保護(hù)和化學(xué)保護(hù),例如采取安裝在線過濾器,自裝填料保護(hù)柱和預(yù)裝保護(hù)柱等。在線過濾器的作用是防止顆粒在柱頭累計,優(yōu)點是基本不影響柱效,在需要高柱效的時候常用,常更換的消耗品是濾芯和墊圈保護(hù)柱的作用是防止柱子被化學(xué)污染。缺點是多數(shù)保護(hù)柱影響色譜柱的柱效,特別是在用微柱時,常用的是普通自裝填料的保護(hù)柱。最近新出的一些保護(hù)柱例如Sentry-guard保護(hù)柱,它的特點是高質(zhì)量、高效填料、增加分析柱效、對臟樣品載荷能力大,能延長保護(hù)柱的壽命,手可擰緊接頭,安裝時不需要工具,省時省,可換芯式設(shè)計,能采用各種不同的填料,主要適用于非常臟非常復(fù)雜的樣品本底,例如生化樣品,環(huán)境樣品和食品等,或者不想做太多的圃相萃取,不想降低柱效果等情況。
2、清洗
對所做的樣品要有充分的了解,用對該樣品洗脫能力*的流動相清洗,對于硅膠柱,先用甲醇洗去極性雜質(zhì),然后用干燥的二氯甲烷和正庚烷100-20OraL依次活化,對于鍵和相柱,一般用甲醇一氯仿一甲醇一水依次沖洗,每種色譜柱有特定的清洗方法,一定要看其使用說明。
3、存放
存放前除去雜質(zhì)和鹽,采用合適的存放溶劑,避免色譜柱床的干枯,避免機(jī)械振動,防止細(xì)菌生長,注意存放的溫度。